心肌梗死 炎症介质 1466 - 1861 0962 - 9351 Hindawi出版公司 10.1155 / 2016/3894816 3894816 研究文章 干扰素效应基因的表达SART1与干扰素治疗反应对乙型肝炎感染 李 勇 1 朱 Chuanlong 2 王 Faxi 3 朱 田田 2 http://orcid.org/0000 - 0002 - 1961 - 7188 李 小君 2 刘 Shufeng 4 http://orcid.org/0000 - 0001 - 7353 - 2700 肖 范 5、6 6 Agrawal 安苏 1 部门和内科医学研究所 同济医院 同济医科大学 华中科技大学 武汉430030 中国 hust.edu.cn 2 传染病科 南京医科大学第一附属医院 南京210029 中国 njmu.edu.cn 3 生物医学研究中心的中心 同济医院 同济医科大学 华中科技大学 武汉430030 中国 hust.edu.cn 4 中心免疫学和传染病 生物科学部门 SRI国际 州 弗吉尼亚州22802 美国 sri.com 5 医学系的 传染病和地理医学的部门 斯坦福大学医学院的 斯坦福大学 CA 94305 美国 stanford.edu 6 微生物学和免疫学 斯坦福大学医学院的 斯坦福大学 CA 94305 美国 stanford.edu 2016年 18 12 2016年 2016年 24 06 2016年 17 10 2016年 20. 10 2016年 2016年 版权©2016勇李et al。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

干扰素- α(IFN - α)限制了反应率在治疗慢性乙型肝炎(慢乙肝)。微分响应IFN的底层机制仍然是难以捉摸的。最近报道,SART1介导的抗病毒干扰素——的影响 α丙型肝炎病毒(HCV)细胞培养模型。在这项研究中,我们调查的角色SART1干扰素的抗病毒活性 α对乙型肝炎病毒(HBV)使用血液和肝脏活检样本与聚乙二醇干扰素治疗慢性乙型肝炎患者 α和HepG2细胞转染克隆HBV DNA。我们观察到,基底SART1表达式在肝脏和PBMCs干扰素治疗明显高于比nonresponders反应者。此外,基线SART1表达水平与程度呈正相关乙肝病毒DNA和e抗原干扰素治疗后下降。从力学上看,沉默SART1废除干扰素的抗病毒活性 α,减少IFN-stimulated基因的表达(ISG) Mx,美洲国家组织,和PKR和减毒JAK-STAT HepG2细胞信号,表明SART1调节IFN-mediated抗病毒活性通过JAK-STAT信号,研究小组的表情。我们的研究论述了重要作用的SART1 IFN-mediated anti-HBV响应并提供新的视角理解变化的干扰素治疗慢性乙肝患者的反应。

 中国国家自然科学基金 81271713 81600472 1。介绍

乙型肝炎仍然是一个全球卫生问题350 - 400人长期全球感染乙型肝炎病毒( 1, 2]。这些病人容易威胁生命的并发症,如乙肝病毒acute-on-chronic肝功能衰竭(ACLF) [ 3)、肝硬化和肝细胞癌(HCC) ( 4]。目前有两类代理批准用于治疗慢性乙型肝炎(慢乙肝):干扰素有ide (t)类似物和标准或聚乙二醇干扰素 α(Peg-IFN - α)[ 5]。干扰素- α先天免疫和适应是一个重要的细胞因子的免疫反应接受抗病毒和免疫调节活动( 4- - - - - - 6]。干扰素- α与受体结合后,激活JAK-STAT信号通路、转录诱导干扰素刺激基因(isg)包括“经典”isg myxious抵抗蛋白质(MxA) [ 7),2,5-oligoadencylate sythase (OAS)和依赖rna的蛋白激酶(PKR) [ 8, 9),发现山对乙肝病毒和其他病毒(抗病毒作用 10]。虽然已经取得了实质性的进展在治疗乙型肝炎在过去的十年中,只有不到30%的病人显示持续对干扰素治疗。

虽然IL-28B基因型HBV基因型,血清ALT和HBV DNA水平在治疗之前被发现影响干扰素治疗的反应( 11- - - - - - 14),宿主基因之间的关系和干扰素治疗乙肝病毒的反应尚不清楚。鳞状细胞癌抗原T细胞(SART1)是公认的作为一个报道 U 4 / U 6 · U 5 tri-snRNP特定要素与特定的E3泛素连接酶活动,扮演重要角色在招聘tri-snRNP剪接体组装( 15]。它调节细胞增殖,因此有潜力用作目标在癌症治疗 16- - - - - - 18]。最近的研究发现,SART1施加其抗病毒活性通过加强研究小组使用丙肝病毒细胞培养模型表达式( 19, 20.]。因为研究小组感应也限制了乙型肝炎病毒感染( 21, 22),我们假设SART1起着调节作用研究小组表达干扰素治疗后对乙肝病毒感染。

在这项研究中,我们找到了一个以前从未发现过的函数的SART1乙肝病毒治疗。我们报告首次SART1表达式与干扰素- α 慢性乙肝患者的治疗反应。此外,消声SART1废除干扰素的抗病毒效果 α 乙肝病毒复制和干扰素的表达——下降 α 下游isg HBV细胞模型。我们的研究揭示了在干扰素SART1——的角色 α 治疗慢性乙肝和提供潜在生物标志物预测干扰素治疗乙型肝炎病毒感染的结果。

 2。材料和方法 2.1。研究对象、临床样本和研究设计

这项研究是按照指南进行《赫尔辛基宣言》的前和接收机构审查委员会批准的南京医科大学第一附属医院,南京,中国。病人的书面知情同意前得到包容。33天真的慢性乙肝患者从2012年到2014年在南京医科大学第一附属医院。天真的慢性乙肝患者的入选标准研究> 10 e抗原阳性和HBV DNA水平4拷贝/毫升。所有接受治疗的病人注射Peg-IFN - α180年 μg每周48周。血液样本以及PBMCs的IFN - α 治疗的患者收集在基线和干扰素-后12周 α 治疗。肝活检样本收集24小时之前干扰素治疗。我们病毒学反应定义为HBV DNA水平< 1000拷贝/毫升,血清学反应e抗原丢失或血清转化,生化反应正常化ALT水平,和结合反应HBV DNA水平< 1000拷贝/毫升和e抗原或HBsAg的损失。剩下的病人被列为nonresponders不能满足标准。我们评估两个端点治疗结合Peg-IFN - 48周后的反应 α持续治疗和联合治疗反应在24周后端点。表中给出的患者的特征 1。

患者纳入研究的基线特征。

特征 急救员 Nonresponders
年龄、y 27±6.62 27.77±3.44
性别、M / F 10/3 17/3
乙型肝炎病毒DNA(日志10拷贝/毫升) 8.03±1.03 8.38±1.37
e抗原(日志10PEIU /毫升) 2.24±1.31 2.4±1.15
HBsAg(日志10国际单位/毫升) 3.71±0.91 4.17±0.78
ALT(国际单位/毫升) 140.55±92.48 178.23±153.35
2.2。标记描述乙型肝炎病毒感染

乙肝病毒DNA测量使用实时PCR (Amplicor乙肝病毒监控测试,罗氏诊断,曼海姆,德国)。HBsAg和e抗原水平测量师HBsAg化验(美国雅培,森林湖,IL)和AxSYM HBe 2.0试验(Abbott),分别。Anti-HBs和anti-HBe由建筑师定性分析(Abbott)。血清生化标记和丙氨酸转氨酶(ALT)血清化验使用自动分析仪(日立747年,日本)。

 2.3。质粒和试剂

phbv - 1.3生成从描述的乙肝病毒基因组 22]。干扰素刺激响应元素荧光素酶报告质粒(pISRE-luc)请提供的林教授正为温榆(马萨诸塞州综合医院、哈佛医学院、波士顿)。特定的小核RNA) SART1 (siSART1) IFNAR (siIFNAR)和核控制买来RIBOBIO生物科技(广州)。

 2.4。细胞培养

从美国获得了人类肝癌细胞株HepG2类型文化收藏。HepG2细胞生长在杜尔贝科修改鹰的介质(DMEM)补充10%胎牛血清(Gibco BRL,马里兰州)37°C公司为5%2。细胞被镀在12-well或6-well板根据实验和-70%增长到60%转染前融合。

 2.5。荧光素酶报告实验和转染

HepG2细胞与表示siRNA reverse-transfected 12-well板质粒转染前24小时使用Lipofectamine 2000(表达载体)。干扰素刺激响应元素(ISRE)介导的干扰素信号被dual-luciferase记者试验监控系统在cotransfecting pISRE-luc质粒表达萤火虫荧光素酶和pRL-TK质粒表达Renilla荧光素酶作为内部控制。p-ISRE转染48小时后,1000国际单位/毫升IFN - α添加和孵化别人描述的细胞为8小时( 23- - - - - - 26]。相对荧光素酶活性被Promega评估dual-luciferase记者分析系统(Pro-Omega,麦迪逊,WI)。相对荧光素酶单位(RLU)计算了萤火虫荧光素酶值除以Renilla荧光素酶值。

 2.6。量化的HBV e-Ag Ag)和乙肝病毒表面

细胞转染表示,在DMEM培养了一个额外的24小时没有的边后卫和抗生素。收集的媒体,一个标准的酶联免疫试剂盒用于量化HBV e-Ag (e抗原)和乙肝病毒表面Ag (HBsAg)(上海KeHua生物科技、上海、中国)。

 2.7。中存在

细胞培养PBMCs RNA, RNA的慢性乙肝患者提取试剂盒试剂(表达载体,卡尔斯巴德,CA)和reverse-transcribed cDNA kr - 103逆转录酶(Tiangen,北京)。表达水平的量化存在7500 HT存在系统上执行(应用生物系统公司,生活技术,达姆施塔特,德国)使用CT方法。相对mRNA水平的目标基因都是归一化辅助基因(GAPDH)水平。目标基因的引物序列如表所示 2。

序列中存在目标基因的引物。

基因 向前 反向
GAPDH cggatttggtcgtattggg ctcgctcctggaagatgg
SART1 gaaccttgtggcttctcttca gtcatccactgcccattagg
MxA acctgatggcctatcaccag tgaagaactggatgatcaaagg
美洲国家组织 gacggatgttagcctgctg tggggatttggtttggtg
PKR aaagcgaacaaggagtaag gatgatgccatcccgtag
2.8。免疫印迹分析

目标基因的蛋白质是准备如前所述 27]。每个样本的蛋白质浓度确定BCA蛋白质化验设备P0012S (Beyotime,中国)。蛋白质被叠加凝胶和sds - page分离三在100 V 90分钟和甘氨酸系统转移到聚偏二氟乙烯膜(美国微孔)。膜被封锁的脱脂奶粉3%磷酸盐与脱脂奶粉。被孵化主要抗体1 - 2小时后,膜清洗三次,孵化与辣根peroxidase-conjugated二级抗体。墨迹与发射极耦合逻辑开发免疫印迹基质(热刺穿,罗克福德,IL)。抗体对MxA (Abs), β肌动蛋白是购自圣克鲁斯生物技术(圣克鲁斯,CA), Abs对SART1 STAT1, p-STAT1, STAT2,和p-STAT2购买从SAB技术(美国Signalway-Antibody)和Abs PKR和美洲国家组织从PTG购买实验室(Rosemont, IL)。带强度被gel-pro量化软件。

 2.9。免疫组织化学

肝脏部分(> 4毫米)从石蜡块,然后用3% H2O2特里同,permeabilized 0.5%,孵化3%牛血清白蛋白(BSA)。样本沾兔子反SART1多克隆抗体(1:100)在37°C 45分钟,其次是孵化与HRP-conjugated山羊anti-rabbit马伯(Boshide,武汉,中国)37°C 30分钟根据免疫组织化学的教学工具(SP9001;北京中山生物技术,中国)。

 2.10。统计分析

统计分析是由学生的 t 测试或Mann-Whitney U 以及,如适当。目标基因的表达及其与临床指标的相关性是由皮尔森相关处理。所有与SPSS统计分析进行了v。美国芝加哥11 (SPSS)。 p < 0.05 被认为是具有统计学意义。

 3所示。结果 3.1。预处理SART1表达水平与干扰素-α<斜体> < /斜体>反应在慢性乙肝患者

使用immune-histochemical染色和存在,我们首先分析了SART1的表达在生活活组织检查和PBMCs慢乙肝患者干扰素- α治疗。有趣的是,肝SART1基线水平表达反应显著高于在nonresponders(图 1(一))。PBMCs的SART1 mRNA表达干扰素反应也显著高于nonresponders(图 1 (b))。此外,在所有的慢性乙肝患者接受干扰素治疗,预处理SART1表达PBMCs HBV DNA和e抗原下降呈正相关,从0到12周(图 1 (c))。这些结果说明SART1表达式与病毒学应答的干扰素治疗慢乙肝病人,表明SART1起着关键作用的抗病毒干扰素对抗乙肝病毒的效果。

SART1基因的表达与干扰素治疗的结果。(a - b) SART1表达式在肝脏血液(a)和(b)和干扰素应答器之间nonresponders之前Peg-IFN - α治疗评估肝脏的免疫组织化学染色(a)和qPCR (b)。在组织部分阳性染色强度分析了集成光密度(IOD)显示直方图和是表示为±SD从三个实验一式三份。学生的 t 以及(a)和Mann-Whitney U 以及(b)是用来确定这两组之间的差异的重要性,分别 ∗ ∗ p < 0 。 01 。(c)的相关性SART1基线表达式与乙肝病毒DNA(左面板; r = 0.47 , p < 0.05 )或e抗原下降(右面板; r = 0.49 , p < 0.05 )从0到12周被皮尔逊相关系数评价。

 3.2。沉默SART1限制干扰素的抗病毒活性——<斜体>α< /斜体>

进一步调查的角色在IFN-mediated SART1抗病毒活性,我们撞倒了SART1乙肝病毒复制使用核细胞培养系统。特定的核目标SART1 (si-SART1)转染连同phbv - 1.3成HepG2细胞转染效率(50 - 60%),其次是治疗1000国际单位/毫升外源性干扰素- α24小时posttransfection。转染后48小时,乙型肝炎病毒感染是由乙肝病毒DNA复制评估以及e抗原和HBsAg分泌。如数据所示 2(一个)- - - - - - 2 (c),乙肝病毒DNA复制、e抗原和表面分泌物检测乙肝病毒复制的细胞培养模型。干扰素- α显著抑制HBV DNA复制和e抗原HBsAg分泌。沉默SART1不仅增加了乙型肝炎病毒感染,也妥协干扰素的抗病毒活性,表明SART1施加IFN-associated抗病毒活性在乙肝病毒复制细胞模型。SART1-specific siRNA的效率是通过测量SART1信使rna和蛋白质在图所示 2 (d)。值得注意的是,干扰素抗病毒效应SART1击倒后,仍对重大表明还有其他额外的因素/途径比SART1调节干扰素的抗病毒效果。

沉默SART1对抗干扰素的抗病毒活性 α。(a - c) HepG2细胞cotransfected hbv - 1.3和Si-SART1 24 h。细胞被1000国际单位/毫升IFN -对待 α24 h。转染48 h后,上层的收集和化验的HBV DNA定量实时PCR、e抗原和表面抗原ELISA。一个siRNA-negative控制被用作控制。(d)与si-SART1 HepG2细胞转染。转染后48 h, si-SART1效率检测中存在和免疫印迹。意味着±SD从三个独立的实验中执行一式三份。学生的 t 以及用于确定两组之间的差异的重要性。 ∗ p < 0.05 , ∗ ∗ p < 0.01 。

 3.3。沉默SART1抑制干扰素的表达——<斜体>α< /斜体>下游抗病毒效应物

Mx,美洲国家组织,PKR古典下游isg抗病毒活性。这些ISG-encoded蛋白质干扰病毒复制截然不同的步骤或触发病毒RNA和蛋白质的降解发挥抗病毒活性。探讨SART1的作用在调节这些干扰素下游效应器,之前我们与si-SART1转染HepG2细胞干扰素- α治疗。IFN-induced MxA,美洲国家组织和PKR表达水平测量中存在和免疫印迹。如图 3,SART1击倒信使rna和蛋白质含量减少IFN-induced MxA,美洲国家组织,PKR。这些结果说明沉默SART1废除干扰素的抗病毒活性下调isg表达式。

沉默SART1降低干扰素的表达 α下游效应器。(a, b, c) HepG2细胞转染si-SART1或si-NC 24小时,然后用1000国际单位/毫升干扰素治疗 α24 h。转染后48 h, MxA的mRNA水平,美洲国家组织,分析了PKR存在。 ∗ p < 0.05 。(d)与Si-SART1 HepG2细胞转染或空向量为24小时,然后用1000国际单位/毫升干扰素治疗 α24 h。转染后48 h, MxA的蛋白质含量,美洲国家组织,PKR被免疫印迹分析。意味着±SD从三个独立的实验中执行一式三份。学生的 t 以及用于确定两组之间的差异的重要性。 ∗ p < 0.05 。

 3.4。沉默SART1废除干扰素Anti-HBV功效的衰减JAK-STAT信号

进一步调查SART1的机械作用在调节isg表达式,我们评估了SART1之间互动,isg、JAK-STAT信号使用荧光素酶报告系统由IFN-stimulated响应元素(ISRE)。ISRE-driven荧光素酶活性增加干扰素-三倍以上 α刺激的不属预定目标的核(siCTRL NC)。击倒的SART1 si-SART1显著降低ISRE活动与控制细胞(图 4(一)),这意味着SART1抑制isg表达式通过下调ISRE活动。获得洞察SART1的影响在IFN-induced JAK-STAT信号,我们下一个调查统计后磷酸化SART1击倒。如图 4,击倒SART1显著降低STAT1磷酸化和略STAT2磷酸化(图有所下降 4(b))。相比之下,沉默SART1没有影响总STAT1和STAT2 IFN-induced表达式。综上所述,这些结果表明沉默SART1变弱IFN-induced JAK-STAT信号isg的差别之后,对这些基因的表达。

效果SART1 ISRE活动与IFN-induced JAK-STAT信号。(一)HepG2细胞reverse-transfected表示siRNA p-ISRE前24小时和pRL-TK cotransfection。1000国际单位/毫升IFN - α增加了48 h后。相对发光活动(RLA)测量8 h后。(b)与Si-SART1 HepG2细胞转染48 h和1000 U /毫升IFN -对待 α24 h(统计)或1 h (p-STATs)细胞收获之前。STAT1的表达、STAT2 p-STAT1, p-STAT2取决于西方墨点法。意味着±SD从三个独立的实验中执行一式三份。学生的 t 以及用于确定两组之间的差异的重要性。NS =无意义的, ∗ p < 0.05 , ∗ ∗ p < 0.01 。

 4所示。讨论

虽然干扰素- α和聚乙二醇(Peg-IFN -形式 α)作为一线治疗的慢性乙型肝炎20多年,干扰素治疗的持续反应率仍然远未满足( 26- - - - - - 28]。临床试验数据显示32% HBeAg-positive患者实现e抗原血清转化干扰素治疗后,14%的患者获得检测不到病毒载量( 29日]。因此,多努力都对预测IFN治疗个性化治疗反应。底层干扰素反应机制仍然未知,导致困难改善预测干扰素治疗效果,使个性化的治疗建议。最近我们和其他报道,SART1转录调节干扰素的抗病毒活性 α使用丙肝病毒对丙肝病毒细胞培养模式 19, 20.]。然而,SART1的功能研究只有在丙肝病毒细胞培养模型。进一步探索SART1在干扰素的作用 α的抗病毒效果,在本研究中我们使用了肝脏和PBMCs样本慢乙肝患者和乙肝病毒复制细胞培养模型,以期阐明反应机理干扰素和识别潜在的生物标记物预测干扰素治疗乙型肝炎病毒感染的结果。

我们首先检查基础表达SART1的慢性乙肝患者肝活检样本和外围PBMCs之前干扰素- α治疗。有趣的是,SART1表达干扰素反应显著高于干扰素nonresponders。因此,更高的SART1基线水平强烈建议更好的应对干扰素- α在乙肝病毒治疗。重要的是,SART1基线的表达PBMCs显示正相关的趋势与HBV DNA和e抗原从0到12周下降,分别。这些数据表明,SART1 IFN-associated抗病毒基因对抗乙肝病毒的宿主。在这个场景中,它支持的假设SART1扮演着重要的角色,可能被用作生物标记对干扰素- α治疗。

调查SART1机制包括干扰素- α的抗病毒活性,重要的是关联和干扰素- SART1表达式 αanti-HBV效果。我们撞倒SART1在乙肝病毒复制细胞培养模型,发现沉默SART1废除干扰素- α对乙肝病毒复制的抑制效果与HBV1.3 HepG2细胞转染质粒。结合我们的 在活的有机体内研究协会和干扰素- SART1表达式 αanti-HBV影响乙肝病毒的细胞模型和慢性乙肝患者是有说服力的。接下来,我们努力探索SART1监管的机制IFN-mediated anti-HBV效应,这是依赖于关键isg表达式包括抗病毒蛋白质MxA,美洲国家组织,PKR [ 30.]。MxA蛋白最初发现在小鼠抗甲型流感和被认为对许多病毒调解先天免疫。其anti-HBV机制已经研究的很透彻MxA overexpressing老鼠( 31日]。美洲国家组织的蛋白质能够合成oligoadenylates激活潜在形式的RNaseL然后触发病毒RNA的降解 32]。PKR属于蛋白质激酶,干扰素- α和dsRNA-dependent机制通过抑制翻译EIF2a的磷酸化 9]。然后我们问SART1干扰素-介导的 α通过调节isg上面提到的anti-HBV效果。有趣的是,我们发现了isg mRNA和蛋白表达降低HepG2细胞与干扰素治疗 α在沉默SART1。这些结果与先前的报道是一致的丙肝病毒( 19]。因此,我们的研究进一步的发现早期的研究,表明SART1监管干扰素- α抗病毒活性不仅在丙肝病毒感染,而且在乙型肝炎病毒感染。此外,我们的 在体外研究表明,SART1介导干扰素抗病毒效应对乙肝病毒通过调节下游isg表达式。

值得指出的是,有多种因素调节干扰素的抗病毒效应如前所报道,如载脂蛋白B信使rna编辑酶催化polypeptide-like 3 (APOBEC3)、表皮生长因子受体和核转录因子 κB ( 26, 33, 34]。这是由我们的数据支持,表明击倒SART1只是部分减弱干扰素的抗病毒效果。

进一步研究的详细机制SART1-mediated干扰素anti-HBV效果,我们专注于干扰素信号通路。干扰素-的绑定 αI型干扰素受体激活JAK-STAT信号通路,导致二聚STAT1和STAT2协会干扰素调节因子9形成IFN-stimulated基因因素3复杂,把原子核和结合ISRE促进转录的isg [ 35, 36]。因此,我们试图确定交叉口的SART1干扰素信号通路通过荧光素酶报告系统由ISRE。正如所料,SART1比不属预定目标的siRNA ISRE活动有影响。重要的是,沉默SART1没有影响总STAT1和STAT2的IFN-induced表达式,但显著降低STAT1磷酸化和略STAT2磷酸化有所下降。因此,我们表明,确实SART1干扰素-中扮演一个重要的角色 α信号。

不可否认,在我们的研究有一定的局限性。首先,患者样本的数量相对较小,可以通过扩大研究对象在将来的研究中解决。其次,还需要进一步的研究来探索不同的机制SART1表达在慢性乙肝患者。IL28B单核苷酸多态性,rs12979860 T / C和rs8099917 T / G,已报告与自发和treatment-induced病毒清除丙肝病毒感染 37- - - - - - 39]。SART1 SART1转录启动子多态性及其影响,结合转录因子的多态区域,等等是值得研究 40]。

总之,我们的研究提供了新的见解SART1-mediated isg的监管和响应在慢性乙肝患者干扰素治疗。干扰素的变化 α的抗病毒反应与微分SART1 PBMCs和肝脏基因表达水平。然而,背后的生物机制SART1干扰素的反应——的影响 α治疗需要进一步调查。调查对isg SART1-mediated监管机制和干扰素- α的抗病毒效果,两者兼而有之 在活的有机体内和 在体外,可能提供一个更好的理解的角色SART1在先天免疫应对病毒感染乙肝病毒,小说可能被用来开发抗病毒治疗策略。

 5。结论

总之,我们发现SART1表达式与干扰素治疗反应慢乙肝患者和乙肝病毒复制细胞培养模型。从力学上看,SART1调节IFN-mediated抗病毒活性通过JAK-STAT信号和研究小组归纳。我们的发现可能有助于提供一个潜在生物标志物的干扰素治疗反应在慢性乙肝疾病管理。

 缩写 ALT:

丙氨酸转氨酶

 慢性乙肝:

慢性乙型肝炎

 e抗原:

乙肝病毒e-Ag

 表面:

乙肝病毒表面Ag)

 乙肝病毒:

乙型肝炎病毒

 MxA:

Myxovirus抗性蛋白

 美洲国家组织:

2,5-Oligoadenylate合成酶

 PKR:

蛋白激酶R

 存在:

定量rt - pcr

 SART1:

鳞状细胞癌抗原被T细胞

 si-IFNAR:

对干扰素-核 α 受体

 si-SART1:

核与SART1

 核:

小干扰RNA。

 相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

 作者的贡献

范小开始,设计和监督的研究。勇,Chuanlong竺Faxi王朱田田,小君,Shufeng Liu和范小进行了研究。勇,Chuanlong朱,范小分析数据。勇李和范小写道。

 确认

这个项目一直与教育拨款支持通过基在肝脏Disease-Asia科学研究学者项目和国家自然科学基金资助(没有。81271713也没有。81600472)。

 Protzer U。 Maini m·K。 Knolle p。 生活在肝脏:肝脏感染 自然评论免疫学 2012年 12 3 201年 213年 10.1038 / nri3169 2 - s2.0 - 84857623630 Kwon H。 洛克 答:S。 乙型肝炎治疗 自然评论胃肠病学和肝脏病学 2011年 8 5 275年 284年 21423260 10.1038 / nrgastro.2011.33 2 - s2.0 - 79955672370 21423260 李 Y。 汉 M.-F。 李 W.-N。 史 A.-C。 张 y y。 王 H.-Y。 王 F.-X。 李 l 吴 T。 丁 l 程ydF4y2Ba T。 杨ydF4y2Ba W.-M。 罗 X.-P。 宁 Q。 SOCS3表达式与炎症的严重程度在小鼠肝炎病毒株3-induced急性肝衰竭和HBV-ACLF 华中科技大学学报(医学) 2014年 34 3 348年 353年 10.1007 / s11596 - 014 - 1281 - 5 2 - s2.0 - 84904018959 Lampertico P。 慢性乙型肝炎的皇室婚礼:富人和穷人的聚乙二醇干扰素和干扰素有ide (t)治疗 肝脏病学 2015年 61年 5 1459年 1461年 10.1002 / hep.27731 2 - s2.0 - 84928206707 Nassal M。 乙肝病毒cccDNA:水库的病毒持续感染和治疗慢性乙型肝炎的关键障碍 肠道 2015年 64年 12 1972年 1984年 10.1136 / gutjnl - 2015 - 309809 2 - s2.0 - 84940172646 夏 Y。 施 D。 Lucifora J。 雷 F。 韦伯 D。 Hosel M。 本 T。 Wisskirchen K。 程 X。 张 K。 周 W.-M。 Wettengel j . M。 不全 一个。 Bohne F。 霍夫曼 D。 注视者 F。 Thimme R。 福尔克 c·S。 Thasler w·E。 Heikenwalder M。 Protzer U。 干扰素- γ和肿瘤坏死因子- αT细胞减少乙肝病毒产生的持久性,cccDNA,没有细胞溶解 胃肠病学 2016年 150年 1 194年 205年 10.1053 / j.gastro.2015.09.026 2 - s2.0 - 84952684286 李 N。 张 l 程ydF4y2Ba l 冯 W。 徐 Y。 程ydF4y2Ba F。 刘 X。 程ydF4y2Ba Z。 刘 W。 MxA抑制乙型肝炎病毒复制与乙型肝炎核心抗原 肝脏病学 2012年 56 3 803年 811年 22271421 10.1002 / hep.25608 2 - s2.0 - 84865555186 22271421 公园 I.-H。 Kwon 研究。 Ryu W.-S。 安 B.-Y。 抑制乙型肝炎病毒复制的ligand-mediated L核糖核酸酶的激活 抗病毒研究 2014年 104年 1 118年 127年 24509240 10.1016 / j.antiviral.2014.01.021 2 - s2.0 - 84894431788 24509240 公园 I.-H。 门敏 K.-W。 赵 e y。 安 B.-Y。 干扰素- PKR-dependent机制 α为抑制乙型肝炎病毒复制 分子和细胞 2011年 32 2 167年 172年 10.1007 / s10059 - 011 - 1059 - 6 2 - s2.0 - 81055157995 Lutgehetmann M。 Bornscheuer T。 中场 T。 Allweiss l Bockmann J。 Pollok j . M。 Lohse 答:W。 彼得森 J。 Dandri M。 乙型肝炎病毒反应人类肝细胞的干扰素-的限制 α嵌合小鼠 胃肠病学 2011年 140年 7 2074年 2083. e2 10.1053 / j.gastro.2011.02.057 2 - s2.0 - 79958127932 Sonneveld m·J。 了这 w·P。 詹森 h·l·A。 研究IL28B基因型和反应在慢性乙型肝炎干扰素应该分层乙肝病毒基因型 肝脏病学 2013年 57 3 1283年 22707051 10.1002 / hep.25878 2 - s2.0 - 84874500522 22707051 李 I.-C。 黄 中州。 苏 C.-W。 王 Y.-J。 霍 我。 李 K.-C。 林 H.-C。 CXCL9与持续病毒学应答相关慢性乙型肝炎患者接受干扰素Alfa-2a疗法:一个试点研究 《公共科学图书馆•综合》 2013年 8 10 e76798 10.1371 / journal.pone.0076798 2 - s2.0 - 84885066765 黄 Y.-W。 林 研究所。 魏 研究所。 胡 J.-T。 常 H.-Y。 黄 工程学系。 程ydF4y2Ba D.-S。 程ydF4y2Ba P.-J。 许 P.-N。 杨 s。 花王 黄永发。 减少toll样受体3表达干扰素治疗慢性乙型肝炎患者和其恢复 抗病毒治疗 2013年 18 7 877年 884年 23744559 10.3851 / IMP2630 2 - s2.0 - 84892707497 23744559 Sonneveld m·J。 黄 诉W.-S。 Woltman a . M。 黄 g . l . H。 Cakaloglu Y。 Zeuzem 年代。 巴斯特 e·h·c·J。 Uitterlinden a·G。 汉森 b E。 常ydF4y2Ba h·l·Y。 詹森 h·l·A。 多态性IL28B附近和血清干扰素反应HBeAg-positive慢性乙型肝炎患者 胃肠病学 2012年 142年 3 513年 520. e1 10.1053 / j.gastro.2011.11.025 2 - s2.0 - 84857636648 Makarova o . V。 马卡洛夫 e . M。 鲁曼 R。 65年和110年kDA SR-related蛋白质U4 / U6·U5 tri-snRNP成熟的剪接体的装配至关重要 在EMBO杂志 2001年 20. 10 2553年 2563年 10.1093 / emboj / 20.10.2553 2 - s2.0 - 0035873254 Koh m . Y。 Gagea M。 Sargis T。 Lemos R。 Grandjean G。 Charbono 一个。 Bekiaris V。 Sedy J。 Kiriakova G。 刘 X。 罗伯茨 l R。 制品 C。 战胜挑战者博伊斯 G。 一个新的HIF-1 α/ RANTES-driven通路肝细胞癌由生殖系在与小鼠中haploinsufficiency SART1 /该框架 肝脏病学 2016年 63年 5 1576年 1591年 10.1002 / hep.28468 Koh m . Y。 阮 V。 Lemos R。 Jr。 达 b G。 Kiriakova G。 Abdelmelek M。 何 t·H。 卡拉姆反对 J。 蒙松 f。 Jonasch E。 战胜挑战者博伊斯 G。 与卫生行动框架有关的低氧诱导SUMOylation E3连接酶决定具体激活HIF2透明细胞肾细胞癌 癌症研究 2015年 75年 2 316年 329年 10.1158 / 0008 - 5472. - 13 - 2190 2 - s2.0 - 84921031257 细川 M。 Kadota R。 七丈 年代。 伊藤 K。 德米特里耶夫 我。 Krasnykh V。 亚洲区 d . T。 Takue Y。 Wakasugi H。 高岛 年代。 结构 Y。 细胞周期阻滞和细胞凋亡诱导SART-1基因转导 抗癌的研究 2005年 25 3 1983年 1990年 2 - s2.0 - 21344472989 赵 H。 林 W。 Kumthip K。 程 D。 褐 d . N。 霍夫曼 O。 Jilg N。 大 答:W。 转到 K。 张 l 隐藏 W。 张成泽 j . Y。 彭 l F。 钟 r·T。 功能基因组屏幕显示新宿主基因调节α干扰素抗丙型肝炎病毒的影响 肝脏病学杂志 2012年 56 2 326年 333年 21888876 10.1016 / j.jhep.2011.07.026 2 - s2.0 - 84855920255 21888876 林 W。 朱 C。 在香港 J。 赵 l Jilg N。 褐 d . N。 Schaefer 大肠。 Brisac C。 刘 X。 彭 l F。 徐 Q。 钟 r·T。 剪接体因素SART1施加anti-HCV行动通过信使rna剪接 肝脏病学杂志 2015年 62年 5 1024年 1032年 10.1016 / j.jhep.2014.11.038 2 - s2.0 - 84927788928 Shlomai 一个。 施瓦兹 r·E。 Ramanan V。 履新 一个。 德容 y . P。 巴蒂亚 s . N。 大米 c . M。 建模与乙型肝炎病毒宿主交互使用小学和诱导多功能干细胞肝细胞系统 美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国 2014年 111年 33 12193年 12198年 25092305 10.1073 / pnas.1412631111 2 - s2.0 - 84906319231 25092305 悦 X。 王 H。 赵 F。 刘 年代。 吴 J。 任 W。 朱 Y。 乙型肝炎病毒诱导calreticulin蛋白质参与抗干扰素 《免疫学 2012年 189年 1 279年 286年 10.4049 / jimmunol.1103405 2 - s2.0 - 84862879735 Belloni l Allweiss l Guerrieri F。 Pediconi N。 中场 T。 Pollicino T。 彼得森 J。 Raimondo G。 Dandri M。 Levrero M。 干扰素- α抑制乙肝病毒的转录和复制在细胞培养和人性化的小鼠通过瞄准的表观遗传调控核cccDNA minichromosome 《临床研究杂志》上 2012年 122年 2 529年 537年 10.1172 / jci58847 2 - s2.0 - 84856514985 Christen V。 Duong F。 Bernsmeier C。 太阳 D。 Nassal M。 海姆 m . H。 乙型肝炎病毒抑制α干扰素信号 病毒学杂志 2007年 81年 1 159年 165年 17065208 10.1128 / JVI.01292-06 2 - s2.0 - 33845770748 17065208 Bonvin M。 Achermann F。 Greeve 我。 Stroka D。 基奥计划 一个。 Inderbitzin D。 Candinas D。 大梁 P。 Wain-Hobson 年代。 Vartanian j。 Greeve J。 Interferon-inducible APOBEC3编辑在人类肝细胞和酶的表达抑制乙型肝炎病毒复制 肝脏病学 2006年 43 6 1364年 1374年 16729314 10.1002 / hep.21187 2 - s2.0 - 33745541663 16729314 Lucifora J。 夏 Y。 雷 F。 张 K。 施 D。 程 X。 Sprinzl m F。 Koppensteiner H。 Makowska Z。 中场 T。 Remouchamps C。 周 W.-M。 Thasler w·E。 溶血性尿毒综合征̈呃 N。 Durantel D。 梁 t·J。 妈妈̈k C。 海姆 m . H。 褐变 j·L。 Dejardin E。 Dandri M。 辛德勒 M。 Heikenwalder M。 Protzer U。 具体和nonhepatotoxic退化核cccDNA乙型肝炎病毒 科学 2014年 343年 6176年 1221年 1228年 24557838 10.1126 / science.1243462 2 - s2.0 - 84896029673 24557838 朱 C。 太阳 Y。 罗 X。 杨ydF4y2Ba W。 习 D。 宁 Q。 小说mfgl2反义质粒抑制小鼠fgl2表达式和改善小鼠肝炎病毒类型3-induced重型肝炎在BALB / cJ老鼠 人类基因治疗 2006年 17 6 589年 600年 16776568 10.1089 / hum.2006.17.589 2 - s2.0 - 33745645833 16776568 林 F.-C。 年轻的 h·A。 干扰素:在抗病毒免疫疗法的成功 细胞因子和生长因子的评论 2014年 25 4 369年 376年 10.1016 / j.cytogfr.2014.07.015 2 - s2.0 - 84907966104 刘 g·K·K。 Piratvisuth T。 罗 k . X。 Marcellin P。 Thongsawat 年代。 Cooksley G。 Gane E。 炸 m·W。 王ydF4y2Ba C . C。 Seung w·P。 温 y . C。 伯格 T。 Flisiak R。 McCloud P。 摘下 N。 干扰素Alfa-2a,拉米夫定,HBeAg-positive慢性乙肝的组合 《新英格兰医学杂志》上 2005年 352年 26 2682年 2695年 10.1056 / nejmoa043470 2 - s2.0 - 21244447705 兰德尔 r·E。 Goodbourn 年代。 干扰素和病毒:感应之间的相互作用、信号、抗病毒反应和病毒对策 普通病毒学杂志 2008年 89年 1 1 47 10.1099 / vir.0.83391-0 2 - s2.0 - 36348940608 Peltekian C。 Gordien E。 工作间 F。 Meas-Yedid V。 Soussan P。 威廉 V。 Chaix >。 Olivo-Marin J.-C。 Brechot C。 Kremsdorf D。 人类MxA蛋白参与interferon-related抑制乙型肝炎病毒复制的雌性转基因老鼠 肝脏病学杂志 2005年 43 6 965年 972年 16168514 10.1016 / j.jhep.2005.06.019 2 - s2.0 - 27744589265 16168514 林 R.-J。 余 H.-P。 常 B.-L。 唐 观测。 廖 C.-L。 林 Y.-G。 不同的抗病毒作用对人类2′,5′-oligoadenylate合成酶家庭成员对登革病毒感染 免疫学杂志 2009年 183年 12 8035年 8043年 10.4049 / jimmunol.0902728 2 - s2.0 - 76249133498 Lupberger J。 Duong f·h·T。 Fofana 我。 带 l 肖 F。 主席 C。 杜兰 s . C。 陈训如 P。 蔡塞尔 m B。 海姆 m . H。 Baumert t F。 表皮生长因子受体信号会损害干扰素的抗病毒活性 α 肝脏病学 2013年 58 4 1225年 1235年 10.1002 / hep.26404 2 - s2.0 - 84884977742 菲 l . M。 金 J.-G。 菲 s R。 Carrigan d . J。 贝克 d . P。 威尔 l Homayouni R。 核转录因子的作用 κB在干扰素的抗病毒作用和interferon-regulated基因表达 《生物化学》杂志上 2004年 279年 30. 31304年 31311年 10.1074 / jbc.m308975200 2 - s2.0 - 3843123219 傅 X.-Y。 凯斯勒 d S。 小牛肉 美国一个。 莱维 d E。 达内尔 j·E。 Jr。 ISGF3,干扰素诱导的转录激活因子,由多个相互作用的多肽链组成 美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国 1990年 87年 21 8555年 8559年 2236065 10.1073 / pnas.87.21.8555 2 - s2.0 - 0025172081 2236065 莱维 d E。 凯斯勒 d S。 松 R。 达内尔 j·E。 Jr。 胞质激活ISGF3, interferon-alpha-stimulated转录的积极的监管机构,重组体外 基因与发展 1989年 3 9 1362年 1371年 10.1101 / gad.3.9.1362 2 - s2.0 - 0024721567 田中 Y。 Nishida N。 Sugiyama M。 Kurosaki M。 松 K。 坂本 N。 中川昭一 M。 Korenaga M。 日野 K。 胡须 年代。 伊藤 Y。 Mita E。 田中 E。 Mochida 年代。 Murawaki Y。 本田 M。 酒井法子 一个。 Hiasa Y。 Nishiguchi 年代。 小池百合子 一个。 Sakaida 我。 导演今村昌平 M。 伊藤 K。 矢野 K。 正树 N。 Sugauchi F。 和泉 N。 Tokunaga K。 Mizokami M。 全基因组关联的IL28B对聚乙二醇干扰素- α和利巴韦林治疗慢性丙型肝炎 自然遗传学 2009年 41 10 1105年 1109年 10.1038 / ng.449 2 - s2.0 - 70349533037 苏皮亚达 V。 摩尔多瓦 M。 Ahlenstiel G。 伯格 T。 Weltman M。 减弱 m . L。 Bassendine M。 斯宾格勒 U。 多尔 g . J。 鲍威尔 E。 赖尔登 年代。 谢里丹 D。 Smedile 一个。 Fragomeli V。 穆勒 T。 Bahlo M。 斯图尔特 g . J。 展位 d·R。 乔治 J。 IL28B与应对慢性丙型肝炎干扰素- α和利巴韦林治疗 自然遗传学 2009年 41 10 1100年 1104年 10.1038 / ng.447 2 - s2.0 - 70349548852 通用电气 D。 Fellay J。 汤普森 a·J。 西蒙 j·S。 Shianna k V。 城市 t·J。 Heinzen e . L。 邱 P。 Bertelsen a . H。 穆尔 a·J。 Sulkowski M。 McHutchison j·G。 戈尔茨坦 d·B。 在IL28B基因变异预测丙肝treatment-induced病毒清除 自然 2009年 461年 7262年 399年 401年 19684573 10.1038 / nature08309 2 - s2.0 - 70349292099 19684573 黄 Y。 杨 H。 Borg B . B。 苏 X。 罗兹 s . L。 杨 K。 通 X。 唐 G。 豪厄尔 c, D。 罗森 h·R。 含硫的 c . L。 托马斯。 d . L。 改变 h·J。 酸式焦磷酸钠 r·K。 梁 t·J。 干扰素的功能性SNP - γ基因对干扰素-很重要 α全身的和自发的复苏丙型肝炎病毒感染 美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国 2007年 104年 3 985年 990年 17215375 10.1073 / pnas.0609954104 2 - s2.0 - 33846486344 17215375